جدا سازی ژن زیر واحد g آنزیم v-atpase از قارچ trichophyton rubrum و کلونینگ آن در e.coli

نویسندگان

هاجرالسادات قادری

hajarasadat ghaderi department of microbiology, islamic azad university, north tehran branche, tehran, iranگروه میکرب شناسی،دانشکده علوم پایه، دانشگاه آزاداسلامی،واحد تهران شمال ساسان رضایی

sasan rezaie department of mycology and parazitology, molecular biology section, faculty of health, tehran university of medical sciences, tehran, iranبخش بیولوژی مولکولی،گروه قارچ شناسی وانگل شناسی،دانشکده بهداشت، دانشگاه علوم پزشکی تهران فاطمه نوربخش

fatemeh noorbakhsh department of microbiology, islamic azad university, varamin-pishva branche, varamin, iranگروه میکرب شناسی ،دانشکده علوم پایه ، دانشگاه آزاد اسلامی،واحدورامین-پیشوا مهتاب وفایی

mahtab vafaie department of microbiology, islamic azad university, north tehran branche, tehran, iranگروه میکرب شناسی،دانشکده علوم پایه، دانشگاه آزاداسلامی،واحد تهران شمال کامیار متواضع

چکیده

زمینه و اهداف: t.rubrum) trichophyton rubrum) شایع ترین عامل کچلی انسان در سراسر دنیا می باشد. درمان این بیماری کامل نیست و پس از قطع دارو عود کننده است. اخیراً زیرواحد g از آنزیم v-atpase به-عنوان هدف برای داروها مورد توجه قرار گرفته. هدف مطالعه کلون کردن ژن کدکننده زیرواحد g آنزیم v-atpase قارچ t.rubrum در باکتری e.coli به منظور نگهداری و مطالعه بر روی پروتئین حاصل از آن بود.روش بررسی: dna و rna از قارچ درماتوفیت t.rubrum جدا شد، سپس توسط pcr و rt-pcr تکثیر یافت و محصول rt-pcr در پلاسمید t–ptg19 الحاق شد. پلاسمید نوترکیب با روش شوک حرارتی به داخل e.coli وارد شد. باکتری کشت داده شد و کلنی های مشکوک جدا شدند و مجداداً کشت داده شدند .سپس pcr طبق روش قبل انجام شد. یافته ها: وزن مولکولی dna استخراج شده حدود 750bp و cdna تقریبا 700bp بود. با کشت e.coli بر روی (luria agar (lb agar کلنی های آبی و سفید دیده شد. pcr کردن dna حاصل از کلنی های مشکوک نشان داد 5 کلون از 8 کلون دارای ژن مورد نظر بود. نتیجه گیری: به نظر می رسد که این ژن دارای اینترون است. کلنی های سفید رنگ به احتمال زیاد دارای ژن مورد نظر می باشد. نتایج حاصل از pcr در آخرین مرحله نشان دهنده کلون شدن ژن مورد نظر است.

برای دانلود باید عضویت طلایی داشته باشید

برای دانلود متن کامل این مقاله و بیش از 32 میلیون مقاله دیگر ابتدا ثبت نام کنید

اگر عضو سایت هستید لطفا وارد حساب کاربری خود شوید

منابع مشابه

جدا سازی ژن زیر واحد G آنزیم V-ATPase از قارچ Trichophyton rubrum و کلونینگ آن در E.coli

زمینه و اهداف: T.rubrum) Trichophyton rubrum) شایع ترین عامل کچلی انسان در سراسر دنیا می باشد. درمان این بیماری کامل نیست و پس از قطع دارو عود کننده است. اخیراً زیرواحد G از آنزیم V-ATPase به-عنوان هدف برای داروها مورد توجه قرار گرفته. هدف مطالعه کلون کردن ژن کدکننده زیرواحد G آنزیم V-ATPase قارچ T.rubrum در باکتری E.coli به منظور نگهداری و مطالعه بر روی پروتئین حاصل از آن بود.روش بررسی: DNA و...

متن کامل

همسانه سازی و تعیین خصوصیات ژن زیر واحد c آنزیم H+- ATPase واکوئلی در گیاه هالوفیت Aeluropus littoralis

سابقه و هدف : مدیریت جذب، انتقال، تبادل و کده بندی کردن یون ها و تنظیم دقیق نسبت های یونی در گیاهان به واسطه فعالیت مجموعه ای از ناقل ها، حامل ها و کانال های یونی صورت می پذیرد . پمپ یونی H+-ATPase واکوئلی، نقش مهّمی در ایجاد و حفظ شیب الکتروشیمیایی دارد و انتقال یون ها به داخل واکوئل سلول های گیاهی را تحت تأثیر قرار می دهد . فعالیت این پمپ باعث ایجاد نیروی محرکه پروتونی اولیه برای راه اندازی و ...

متن کامل

molecular characterization of subunit g of the vacuolar atpase in pathogen dermatophyte trichophyton rubrum

trichophyton rubrum is an anthropophilic fungus causing up to 90% of chronic cases of dermatophytosis. several properties of this fungus have been investigated so far. however, a few studies were carried out in the field of molecular biology of this fungus. in the present study, we tried to identify the subunit g of its vacuolar atpase (v-atpase). pairs of 21 nt primers were designed from highl...

متن کامل

بررسی اثر لوواستاتین بر بیان ژن کد کننده پروتئین Ran در قارچ بیماری زای ترایکوفایتون روبروم (Trichophyton rubrum)

ترایکوفایتون روبروم مهم ‌ترین عامل درماتوفیتوزیس بافت پوست و ناخن در سراسر دنیا می‌ باشد. مطالعات زیادی روی این قارچ انجام گرفته است و خصوصیات متعددی از این قارچ در زمینه بیولوژی مولکولی بررسی شده است. لیکن هیچ اطلاعاتی در مورد عملکرد پروتئین Ran در این درماتوفیت در دسترس نمی‌ باشد. در این بررسی اثر غلظت‌های متوالی لوواستاتین بر رشد قارچ ترایکوفایتون روبروم ارزیابی شد. هم‌ چنین اسید نوکلئیک RNA...

متن کامل

جدا سازی ژن گلوکز اکسیداز آسپرژیلوس نایجر و کلونینگ آن در پروکاریوت‌ها

سابقه و هدف: گلوکزاکسیداز آنزیمی است که در صنایع غذایی، شیمیایی، آرایشی و بهداشتی و همچنین در کیت‌های تشخیص گلوکز استفاده می‌شود. هدف این مطالعه شناسایی و جداسازی این ژن از ژنوم قارچ آسپرژیلوس نایجر از طریق PCR و کلونینگ آن درE. coli به منظور پایه‌ای برای تولید گلوکزاکسیداز نوترکیب در ایران است. مواد و روش‌ها: قارچ آسپرژیلوس نایجر (ATCC 9029) در محیط حاوی پپتون و گلوکز و عصاره مالت و در حرارت...

متن کامل

بررسی تاثیر داروی گریزئوفولوین بر روی بیان ژن ATPase - subunit G در قارچ درماتوفیت ترایکوفایتون روبروم

سابقه و هدف: ترایکوفایتون روبروم یکی از درماتوفیت های انسان دوست با انتشار جهانی است. این ارگانیسم یکی از عوامل شایع کچلی در انسان به ویژه کچلی کشاله ران، بدن، پا و دست در همه نواحی دنیا می باشد. خصوصیات متعددی از این قارچ تا به حال مورد بررسی قرار گرفته است، با این وجود در زمینه‌ زیست شناسی مولکولی این قارچ، مطالعات محدودی صورت گرفته است. در مطالعه حاضر سعی شده است تا بیان زیر واحد G ژن ATPase...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید


عنوان ژورنال:
مجله میکروب شناسی پزشکی ایران

جلد ۴، شماره ۳، صفحات ۳۶-۴۴

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023